冷胁迫是关系农农物总产值的注意区域对决之1。钙依赖于性淀粉酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）信息传导到组织细胞并激活开通对面对困境初始化失败的重点调理分子，但其调节作用措施尚不非常清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷过酸表达位点检测工具服务。

用英语标题文字：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

繁体中文宝贝标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

的客户机关单位：浙江大学

实验产品：番茄

拜谱提供数据能力：磷碱化装饰位点在线检测

实验总体目标：

一、调查成果

1、CPK27在较低温度胁迫下展现上浮，而使促进根系耐热性

继往学习认为，CPK27在冷胁迫生活条件下表现调涨。为验证通过某些结杲，这篇文中笔者在使用CPK27的2个敲除突变率系（cpk27 #2，#6）实现抗冻性测试测试，是因为CPK27的转录情况有效高与相较比较组（图1a-b）。在CPK27表现被调控的绿植的中，对抗冻性的促进学习反应有效减小。进这1步的亚内部wifi定位与激活卡学习认为，冷胁迫推动CPK27向内部核累积，并促进学习其磷硝化功能情况（图1 f）。免疫抗体印痕分享进这1步否认冷胁迫帮助 CPK27 在核内蛋清丰度加剧、胞内丰度增多，外源CaCl₂解决可局部恢复正常cpk27的冷敏锐表型，认为CPK27依赖性Ca²⁺手机信号激发反应。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性原则增強番茄抗寒性

2、CPK27依据改善黄大环内酯合并路线化解温度过低神经损伤

转录组测序导致凸显，CPK27的过表示为有明显调整黄吩噻嗪菌物生成关于表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，一并黄吩噻嗪分解代谢径路为有明显聚集。而CPK27变异体中一些表观遗传表示下降，建议CPK27能够 力促黄吩噻嗪生成帮到植物体舒缓地温胁迫获得的腐蚀工作压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq定性分析CPK27干预的冷反应DNA

3、HY5是CPK27介导的抗寒卫星信号环路中的关键所在靶标

为检验 CPK27 与 HY5 的间接反应，小说家要确定了发酵粉双有性杂交（Y2H）科学试验，最终效果证明这两种的产生间接反应（图3a）。双氧分子荧光互补性（BiFC）科学试验进三步是因为CPK27 与 HY5 在生殖细胞质内的发生间接反应（图 3b）。继而在抗体共乳浊液等技术设备，感觉HY5与CPK27在花草机体的产生间接反应，且这两种的间接反应含有钙阳离子（Ca²⁺）依耐性（图 3c）。然而，在Co-IP科学试验的蛋白质提现前施加压力冷胁迫处置，最终效果体现 冷胁迫可增加HY5与CPK27的间接反应（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷硝化作用其最为关键的位点

4、CPK27磷酸性反应HY5促进会其转录渗透性，促进会黄胺类人类基因表达爱

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化表达位点加测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并增加其稳定的性

5、CPK27 在类黄酮菌物提炼径路中用于HY5的品牌进入校园市场

宗合DNA表示和排泄物定性分析最终结果（图5），CPK27在冷胁迫回复过程中 中使用于HY5的上中下游，在调空 HY5 介导的类黄酮怪物自动合成环路导致动植物耐冷性。

图5 CPK27反应于HY5品牌进入校园市场

二、好的文章工作小结

综合上面的说明，今天探讨说明CPK27磷硝化作用装饰HY5球蛋白，缴活类黄酮炼制条件，采取抗被氧化化学物质积聚，因此增进耐寒性工作能力。该探讨具体分析了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节管控缘由（图6），证明CPK27介导的HY5磷硝化作用是相连接钙电磁波与次生排泄防卫的关键因素要素，为认为草本花卉磨难积极响应互联网出示了新第一视角。

图6 CPK27-HY5摸块提升 蕨类植物承受冷胁迫的工作机制

三、拜谱个人心得体会

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、淡化血清质组学、基础代谢组学、转录组学等两组学的产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

决定性资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134